基因组文库与cDNA文库
内容
基因组文库和cDNA文库都用于基因克隆以分离不同的DNA。这两个文库之间的区别在于,基因组文库包含表达生物体整个基因组的DNA片段,而在cDNA文库中,mRNA取自生物体的特定细胞,然后cDNA在反应中由该mRNA组成通过酶。
内容:基因组文库与cDNA文库的区别
- 比较表
- 什么是基因组库?
- 什么是cDNA文库?
- 关键差异
比较表
基础 | 基因组库 | cDNA文库 |
定义 | 基因组文库是来自一个生物体的完整基因组DNA的集合。 DNA存储在一组相似的载体中,每个载体都包含一个不同的DNA插入片段。 | cDNA文库是插入到选定宿主细胞中的克隆cDNA片段的混合物,这些宿主细胞共同构成了生物体转录组的某些部分。 |
表达 | 整个基因组 | 仅特定基因。 |
尺寸 | 大 | 较小的 |
内含子 | 当前 | 缺席 |
向量 | 它利用质粒,粘粒,λ噬菌体,YAC和BAC容纳大片段。 | 它不是内含子,因此可以利用质粒,噬菌粒,λ噬菌体来容纳适度的片段。 |
什么是基因组库?
在基因克隆过程中,目的基因是从与生物体分离的DNA中复制的。当DNA从生物体中分离出来时,它的基因就一次被提取出来了。生物体的DNA包含数千种不同的基因。遗传工程师发现了一个编码特定目的蛋白质的特定基因。
绝对没有一种方法可以利用DNA中的特定基因,因此科学家建立了基因库来对生物体的DNA进行分类。科学家,然后在文库中选择所需的基因。基因文库是一组活细菌菌落,它们已被所需基因起源的生物体中独特的DNA片段转化。从生物体中提取DNA,以建立一个有组织的DNA库。基因组文库和cDNA是两种基因文库。许多基因克隆技术已被用作重组技术中的基因策略。
通过用特异性限制酶切割从母体DNA中分离出DNA片段。将这些片段连接到载体分子,然后将累积的分子移入宿主细胞,每个细胞中有1个分子。基因组文库由内含子,垃圾DNA和许多其他片段组成。在该文库中,DNA被分解为细胞内的较小片段。然后,将所有小部分插入向量中以创建一个库。基因组文库包含整个基因的所有DNA,细胞包含其所有内含子。基因组DNA是整个基因组的翻译。由于内含子的大小,它不能将整个部分编码在一个密码子上。基因组文库中没有任何剪接机制会导致从该文库中提取基因的表达困难。
什么是cDNA文库?
通过选择一种组织或细胞类型来构建cDNA文库。随后从该组织或细胞中分离出mRNA。 mRNA分子的DNA拷贝由特定的酶逆转录酶组成。因此cDNA文库包含mRNA中存在的特定DNA。在该文库中找不到内含子和DNA序列。在该库中,所有克隆都是全长的。此外,cDNA克隆对于转染细胞以生产蛋白质或进行基于细胞的测定至关重要。
关键差异
- 基因组文库直接由基因组DNA编写。
- 以mRNA为模板形成cDNA文库。
- 基因组文库占据了该生物的整个基因组。
- cDNA文库仅代表特定疾病的基因。
- 两种酶,限制性核酸内切酶和连接酶对于基因组文库的构建很重要。
- 逆转录酶在cDNA文库构建中起重要作用。
- 基因组文库占据了原核生物和真核生物的DNA。
- cDNA文库仅代表真核生物的DNA。
- cDNA文库能够在原核细菌中进行基因组表达,因为它们缺少内含子。
- 基因组库无法在原核生物中说出来,因为它们具有内含子,而原核生物没有任何处理内含子的机器。